一、产品简介：

　　酶标仪（MicroplateReader）是对酶联免疫检测（EIA）测验结果举行读取和理解的专业仪器。酶联免疫反响通过偶联正在抗原或抗体上的酶催化显色底物举行的，反响结果以色彩显示，通过显色的深浅即吸光度值的巨细就能够判决标本中待测抗体或抗原的浓度。

　　酶标仪遍及地使用正在临床考验、生物学咨询、农业科学、食物和情况科学中，独特正在近几年中，因为巨额的酶联免疫检测试剂盒的使用，使得酶标仪正在生殖保健范畴中使用越来越遍及，同时鼓动了生殖强壮技巧水准升高。

　　目前国内很多计生站体例发展了酶免检测项目，如：乙肝五项、爱滋病检测、优生优育系列检测、激素检测等。过去多半采用目测步骤，报出的结果缺乏科学的凭据。比方：某弓形虫检测试剂盒中，临界值划定为：阴性对比品的OD值×2.5,通过目测无法判决标本孔的反响色彩是否越过临界值。肉眼举行两孔之间的色彩对比大概还行，但对比一孔的色彩是否越过另一孔色彩的2.5倍就不大概。

　　国内多家巨子机构，如卫生部临床考验中央和策动生育体例等多次夸大酶标仪的苛重性，并央求酶联免疫检测试剂应应用酶标仪判读，酶免试剂的质控也应应用酶标仪，并供给酶标仪测定的原始数据，而各厂家的试剂盒仿单没有是让用目测的。同时酶免检测的项目往往是少许实际性的濡染和病变（如：肝炎、爱滋病、优生优育等），判读更央求苛谨，由误诊惹起的纠葛很难管束。其它，住院手术病人术前的丙肝、爱滋等EIA试剂检测是避免因输血惹起濡染激发的医疗变乱纠葛的须要技巧，正渐渐被很多单元所采用。

　　行动微孔板比色计的酶标仪，其根基功效不过乎一个比色测定，所差异的是正在测定波长限造、吸光度限造、光学体例、检测速率、震板功效、温度节造、定性和定量测定软件功效等方面的差别，当然全自愿酶免疫理解体例还拥有自愿洗板、温育、加样等功效。正在临床测验室现实职责中，测验职员正在应用酶标仪举行测定操作时，有时不免会对酶标仪的少许职能目标形成困惑，以至对酶标仪的使用形成舛误的清楚。如诸如应用酶标仪较用肉眼旁观测定的阳性率昭着填补云云的题目。

　　凡是酶标仪的测定波长正在400~750nm或800nm之间，齐备能够满意ELISA的显色测定。目前国内常见的ELISA试剂盒所应用的标帜用酶均为辣根过氧化物酶（HRP），底物时时为四甲基联苯胺（TMB）和邻苯二胺（OPD），其正在过氧化氢溶液的存鄙人，经HRP影响，分散氧化为2,2,-二氨基偶氮苯（DAB）和联苯醌。当pH值为5.0摆布时，DAB正在450nm波甜头有最大吸取，当pH值降为L 0时，最大吸取波长移至492 nm,同时摩尔消光系数变大，显色加深，于是常用强酸如硫酸或盐酸终止反响。TMB的氧化产品联苯醌正在波长450nm处有最大消光系数，假设HRP量少，H:O:和TMB过量时，则造成蓝色的阳离子根。消重pH,即可使蓝色的阳离子根改造为黄色的联苯醌，应用硫酸行动终止剂可使产品稳固90min.所以，450nm和492 nm两个波长是目前ELISA测定最常用的。各样酶标仪都配有安放滤光片的可自愿转换的部件，能够同时安置6~8片滤光片，所装备的滤光片均应蕴涵上述两个波长，有的酶标仪以490nm滤光片替换492nm滤光片，影响不大。除了这两个根基滤光片表，思索到双波长比色的必要，还应有620nm或630nm或650nm和405nm波长的滤光片，其他滤光片可遵循我方的必要抉择。有时，有的测验室欲望用酶标仪作微量生化测定，故酶标仪出产厂家对其出产的酶标仪扩展了紫表检测功效，此时必要一个340nm波长滤光片。此时，酶标仪的测定波长限造就成为340-750nm或800nm。

　　酶标仪有单波长和双波长检测功效有时应用者不知正在什么情状下应用单或双波长检测。所谓的“单波长”便是应用一种对显色具最大吸取的波长即450 nm或492 nm举行比色测定；而“双波长”则除了用对显色具最大吸取的波长即450 nm或492 nm举行比色测定表，同时用对特异显色不敏锐的波长如630 nm举行测定，酶标仪结尾打印出来的吸光度则为二者之差。630 nm波长下取得的吸光度口角特异的，来自于板子上诸如指纹、尘土、脏物等所致的吸取。所以，正在ELISA比色测定中，最好应用双波长，且不必设空缺孔。

　　时时，酶标仪的吸光度测定限造正在。0-2.5之间即能够满意ELISA的测定央求。早期的酶标仪可测定的吸光度凡是正在0-2.5之间，但现正在根基上都做了拓宽，可抵达3.5以上，而且能保留很好的严紧度与线性。如上海游目仪器公司MB-96C的吸光度测定限造（Abs）0-4.0，正在0-4.0限造，所以对待酶标仪的吸光度限造不必去当真找寻大的吸光度限造，合键要看正在肯定的吸光度限造内的线性和严紧度奈何。

　　酶标仪的光学体例采用的是笔直光途多通道（时时为8或12通道，亦有单通道）检测，凡是为硅光管或光导纤维，除测定通道表，有的酶标仪另有一个参比通道，每次测定可举行自我校准。酶标仪的光学体例功效奈何，均可通过酶标仪测定的吸光度限造、线性度、严紧度和凿凿度等再现出来。光学体例好的话，则上述目标也应较佳。测定的严紧度与测定通道之间的均一性有直接相合。单通道可避免因通道差异所致的差别。

　　酶标仪的检测速率是指其竣工比色测定所必要的时辰。检测速率疾，有利于升高检测的严紧度，即避免因为测定流程中，因测依时辰差异所致的各微孔间吸光度间的差别。目前市集上常见的酶标仪检测速率都十分疾，时时正在数秒钟内，如上海游目仪器公司MB-96B和MB-96C检测96孔只需单波长≤3秒/96孔，双波长≤6秒/96孔。

　　酶标仪的震板功效是指酶标仪正在对ELISA板孔举行比色测定前对其举行振荡混匀，使板孔内色彩均一。目前市集上常见的酶标仪均有震板功效，如上海游目仪器的MB-96C振板功效速率和时辰可调。应用有震板功效的酶标仪，正在举行ELISA测定显色反响竣工插足终止剂后，可不必振荡混匀，直接放人酶标仪上测定即可。

　　温育功效是指酶标仪自己能按央求自愿精准地节造仪器内部的温度，使得ELISA测定中微孔板条的温育流程可正在仪器内部竣工，而无需再表配温箱。如上海游目仪器公司的MB-96B和MB-96等型号都拥有恒温孵育功效。温育功效只是酶标仪的一个附加功效，是否拥有并不行证实酶标仪层次的凹凸及仪器的优劣。行动测验室是否抉择，则可遵循我方测验室的前提及必要来决意。

　　软件功效是指酶标仪所拥有的对ELISA定性和定量测定及其他测定格式如酶标动力学、紫表和凝结等数据的统计理解并讲述结果的功效。软件功效是中高级酶标仪的一个十分苛重的功效。假设硬件方面区别不大，则软件就成为判断酶标仪优劣的惟一目标。对待用户来说，好的软件功效，对现实职责会有较大的帮帮。ELISA定性测定，酶标仪如拥有阳性判决值（cut-off）及其测定“灰区”（即指测定吸光度处于cut-off周遭的肯定区域，此区域内结果应为“可疑”）的统计预备功效，不单便当了测验室职责职员，况且正在某些特定的情状下，有很高的适用价钱。如血站测验室为筛检献血员血举行HBsAg、抗HCV和抗HIV等的ELISA测依时，常会遭遇测定吸光度处于cut-off左近但又低于cut-off的血，遵照试剂盒的法式，可判为阴性，血为及格血，可用于患者输血，但直觉告诉咱们，云云的血如输给患者，导致输血表态应疾病爆发的大概性较大，这是由ELISA现有的测定技巧的不确定性所形成的，也便是ELISA测定的“灰区”的存正在使得ELISA测定试剂盒cut-off的设定只是相对的凿凿，此时的假阳性和假阴性产生的大概性较低。所以，正在血站筛检献血员血时，如以测定“灰区”的下限行动判决献血员血筛检不足格法式，就能够避免因“灰区”所致结果判决舛误而惹起输血后疾病爆发的大概性。适当的软件功效对待ELISA定量测定同样很苛重。有咨询说明，四参数方程能较好地反响免疫测定的剂量反响弧线，最为适合于定量酶免疫测定的弧线拟合。所以，如宗旨是定量测定，则正在酶标仪的软件功效中，最好要有这种弧线回归方程预备理解功效。其他诸如连点、直线等回归预备，则可遵循酶标仪的使用宗旨而定，如兼用于微量生化测定，则此类回归预备就很有须要。

　　其余，酶标仪兼做酶标动力学、凝结反响测定所需的软件是否应具备，当然也应遵循应用宗旨而定。因为此类软件凡是都较为腾贵，酶标仪常其它零丁按需装备，假设不是测验室卓殊必要，就不必强求这种软件功效。

　　时时中高级酶标仪都带有触摸操作屏，无需正在表接电脑应用，这对待某些下层测验室大概会供给很好的帮帮，从而局面部地施展酶标仪的影响。如上海游目仪器公司的MB-96C酶标仪采用10.4英寸彩色液晶触摸屏，全新Windows彩色图形化界面，全中文操作体例，赞成鼠标、键盘，赞成多种输入法。云云就大大便当了普遍下层测验室技巧职员的应用。

　　综上所述，即使酶标仪的兴盛极为火速，品种繁多，功效也无间加紧，但其最底子的功用是稳固的，即比色测定。大凡比色测定，其根基央求便是正在肯定吸光度限造内要有好的测定凿凿性、线性和严紧性。同样的吸光度限造，测定的凿凿性、线性和严紧性越好则酶标仪亦越佳。

　　况且，因为用于酶标仪比色测定的为多孔（时时为96孔）微孔板条，为保障测定的孔间反复性，则测定速率也是一个较苛重的职能目标。至于其他如震板、温育及相合的软件功效，则可遵循各自测验室的必要去对比抉择。

　　酶标仪是一种严紧的光学仪器，所以杰出的职责情况不光能确保其凿凿性和稳固性，还可能延迟其应用寿命。遵循DINVDE0871条例，仪器应安放正在无磁场和扰乱电压的地方。凭据DIN45635-19条例：

　　酶标仪的功效是用来读取酶联免疫试剂盒的反响结果，所以要取得凿凿结果，试剂盒的应用务必楷模。很多病院正在应用酶标仪之前是通过目测判决结果，操作流程粗心性较大，正在应用酶标仪后假设不行实时更改操作民俗，会形成较大偏差。正在酶标仪的操作中应提防以下事项：