酶联免疫试剂
- 产品简介: 本试剂盒采用间接比赛ELISA办法检测液态奶、奶粉等样本中的黄曲霉毒素M1(Aflat
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一、产品简介:
本试剂盒采用间接比赛ELISA办法检测液态奶、奶粉等样本中的黄曲霉毒素M1(Aflatoxin M1,A残留量,试剂盒由预包被偶联抗原的酶标板、辣根酶标志物、抗体、圭表品及其他配套试剂构成。检测时,参预圭表品或样本溶液,样本中的黄曲霉毒素M1和酶标板上预包被偶联抗原比赛抗黄曲霉毒素M1抗体,参预酶标志物后,用TMB底物显色,样本吸光度值与其所含黄曲霉毒素M1含量成负联系,与圭表弧线斗劲即可得出样本中黄曲霉毒素M1的残留量。如正在运用流程中遭遇题目,请与事情华南生物工程有限公司手艺职员干系。4.1 仪器:酶标仪、打印机、均质器、氮气吹干装备、振荡器、离心术、刻度移液管、天平(感量0.01g)1)取1ml液态奶于50ml离心管中,参预4ml乙腈,振荡5分钟, 室温4000转/分,离心10分钟;2)取2.5ml上清液,于50℃-60℃下氮气或氛围吹干或水浴挥干。加1ml复溶液,振荡混匀;1)称取5.0g奶粉于50ml离心管中,参预20ml样本提取液,振荡5分钟,过滤或室温4000转/分,离心10分钟;2)取1ml滤液或清液,于50℃-60℃下氮气或氛围吹干或水浴挥干。加750µl复溶液,振荡混匀;将所需试剂从4℃冷藏境况中取出,置于室温均衡30min以上, 洗涤液冷藏时或者会有结晶需收复到室温以宽裕熔解,每种液体试剂运用前均须摇匀。取出须要数目标微孔板及框架,将不必的微孔板放入自封袋,保管于2-8℃。样本和圭表品对应微孔依次编号,每个样本和圭表品做2孔平行,并纪录圭表孔和样本孔所正在的地位。圭表品或样本50µl/孔到各自的微孔中,然后加酶标志物50µl/孔,再参预50µl/孔的抗体事情液,用盖板膜封板,轻轻振荡5秒混匀,25℃反响30分钟。静置30秒后弃去,反复洗涤5次,末了一次拍干(用吸水纸拍干,拍干后未被消灭的气泡可用整洁的枪头刺破)。孔参预底物液A 50µl,再加底物液B 50µl,轻轻振荡5秒混匀,25℃避光显色15分钟(若蓝色过浅,可适应拉长反当令间)。酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值(倡导用双波长450/630nm)。测定应正在终止反响后10分钟内达成。如正在运用流程中遭遇题目,请与事情华南生物工程有限公司手艺职员干系。圭表液或样本的百分吸光率等于圭表液或样本的百分吸光度值的均匀值(双孔)除以第一个圭表液(0ppb)的吸光度值,再乘以100%,即A—圭表溶液或样本溶液的均匀吸光度值以圭表液百分吸光率为纵坐标,对应的圭表液浓度(ppb)的对数为横坐标,绘造圭表液的半对数弧线图。将样本的百分吸光率代入圭表弧线中,从圭表弧线上读出样本所对应的浓度,乘以其对应的稀释倍数即为样本中待测物的实质浓度。若使用试剂盒专业认识软件举行打算,更便于豪爽样本的切确、敏捷认识。(如正在运用流程中遭遇题目,请与事情华南生物工程有限公司手艺职员干系。)8.2 正在洗板流程中若是展示板孔干燥的情景,则会展示圭表弧线不行线性,反复性欠好的地步。以是洗板拍干后应立地举行下一步操作。8.3 混杂要匀称,洗板要彻底,正在ELISA认识中的再现性,很大水准上取决于洗板的类似性。8.4 正在全面孵育流程中,用盖板膜封住微孔板,避免辉煌 不要运用过了有用期的试剂盒,不要调换运用分别批号试剂盒中的试剂。8.6 显色液若有任何色彩说明变质,该当弃之。0圭表的吸光度值幼于0.5个单元(A450nm 0.5 )时,显示试剂或者变质。