一、产品简介：

　　通过测定必然体积培植液中所含菌丝的量来反应微生物的成优点境。本事是，取必然量的待测培植液（如10毫升）放正在有刻度的离心管中，设定必然的离心时代（如5分钟）和转速（如5000 rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。菌丝浓度测定法是大界限工业发酵分娩上微生物成长的一个要紧监测目标。这种本事比拟粗放，简明，速捷，但必要设定相似的处分条款，不然过失很大，因为离心重淀物中混杂有少许固体养分物，结果会有必然过失。

　　称干重法：可用离心或过滤法测定。日常干重为湿重的10-20%。正在离心法中，将必然体积待测培植液倒入离心管中，设定必然的离心时代和转速，举行离心，并用净水离心洗涤1-5次，举行干燥。干燥可用烘箱正在105 ℃或100℃下烘干，或采用红表线℃下真空干燥，干燥后称重。如用过滤法，丝状真菌可用滤纸过滤，细菌可用醋酸纤维膜等滤膜过滤，过滤后用少量水洗涤，正在40C下举行真空干燥。称干重发法较为麻烦，平常获取的微生物产物为菌体时，常采用这种本事，如活性干酵母（activity dry yeast, ADY）,少许以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。

　　比浊法：微生物的成长惹起培植物污浊度的增高。通过紫表分光光度计测定必然波长下的吸光值，占定微生物的成优点境。对某一培植物内的菌体成长作依时跟踪时，可采用一种特造的有侧臂的三角烧瓶。将侧臂插入光电比色计的比色座孔中，即可随时测定其成长景况，而不必取菌液。该法合键用于发酵工业菌体成长监测。如我所行使UNICO公司的紫表-可见分光光度计，正在波长600nm 处用比色管依时测定发酵液的吸光光度值OD600，以此监控i的成长及诱导时代。

　　菌丝长度丈量法：对付丝状真菌和少许放线菌，能够正在培植基上测定必然时代内菌丝成长的长度，或是诈欺一只一端启齿并带有刻度的细玻璃管，到入符合的培植基，卧放，正在启齿的一端接种微生物，一段时代跋文实其菌丝成长长度，借此权衡丝状微生物的成长。

　　血球计数板法:血球计数板是一种有非常构造刻度和厚度的厚玻璃片，玻片上有四条沟和两条嵴，焦点有一短横沟和两个平台，两嵴的表比两平台的轮廓高0.1 mm，每个平台上刻有差异规格的格网，焦点0.1 mm面积上刻有400个幼方格。通过油镜张望，统计必然大格内微生物的数目，即可算出1毫升菌液中所含的菌体数。这种本事简明，直观，迅速，但只适宜于单细胞形态的微生物或丝状微生物所形成的孢子举行计数，而且所得结果是包含死细胞正在内的总菌数。

　　染色计数法：为了补偿少许微生物正在油镜下不易张望计数，而直接用血球计数板法又无法分辨死细胞和活细胞的亏折，人们发懂得染色计数法。借帮差异的染料对菌体举行得当的染色，能够更容易的正在显微镜下举行活菌计数。如酵母活细胞计数可用美蓝染色液，染色后正在显微镜下张望，活细胞为无色，而死细胞为蓝色。

　　比例计数法：将已知颗粒（如霉菌孢子或红细胞）浓度的液体与一待测细胞浓度的菌液按必然比例平均混杂，正在显微镜视野中数出各自的数量，即可得未知菌液的细胞浓度。这种计数本事比拟粗放。而且必要配造已知颗粒浓度的悬液做规范。

　　液体稀释法：对未知菌样做接续十倍系列稀释，遵照臆度数，从最适宜的三个接续的10倍稀释液中各取5毫升试样，接种1毫升到3组共15只装培植液的试管中，经培植跋文实每个稀释度浮现成长的试管数，然后查z大或然数表MPN（most probably number）得出菌样的含菌数，遵照样品稀释倍数估量出活菌含量。该法常用于食物中微生物的检测，比如饮用水和牛奶的微生物限量反省。

　　平板菌落计数法：这是一种最常用的活菌计数法。将待测菌液举行梯度稀释，取必然体积的稀释菌液与符合的固体培植基正在固结前平均混杂，或将菌液涂布于已固结的固体培植基平板上。保温培植后，用平板上浮现的菌落数乘以菌液稀释度，即可算出原菌液的含菌数。日常以直径9cm的平板上浮现50-500个菌落为宜。但本事比拟困难，操作家需有熟练的时间。平板菌落计数法不但能够得出菌液中活菌的含菌数，况且同时将菌液中的细菌举行了一次区别培植，取得了单克隆。

　　试剂纸法：正在平板计数法的根本上，发扬了幼型商品化产物以供速捷计数用。办法有幼型厚滤纸片，琼脂片等。正在滤纸和琼脂片中吸有符合的培植基，个中插足活性指示剂2，3，5-氯化三苯基四氮唑（TTC，无色）待蘸取测试菌液后置密封包装袋中培植。短期培植后正在滤纸上浮现必然密度的玫瑰色轻细菌落与规范纸色板上图谱比拟即可估算出样品的含菌量。试剂纸法计数迅速确切，比拟而言避免了平板计数法的人工操作差错。

　　膜过滤法：用异常的滤膜过滤必然体积的含菌样品，经丫叮橙染色，正在紫表显微镜下张望细胞的荧光，活细胞会发橙色荧光，而死细胞则发绿色荧光。

　　心理目标法：微生物的成长伴跟着一系列心理目标产生转折，比如酸碱度，发酵液中的含氮量，含糖量，产怀抱等，与成长量相平行的心理目标良多，它们可动作成长测定的相对值。

　　测定含氮量：大无数细菌的含氮量为干重的12.5%，酵母为7.5%，霉菌为6.0%。遵照含氮量×6.25，即可测定粗卵白的含量。含氮量的测定本事有良多，如用硫酸，过氯酸，碘酸，磷酸等消化法和Dumas测N2气法。Dumas测N2气法是将样品与CuO混杂，正在CO2气流中加热后形成氮气，搜罗正在呼吸计中，用KOH吸去CO2后即可测出N2的量。

　　测定含碳量：将少量（干重0.2-2.0 mg）生物质料混入1毫升水或无机缓冲液中，用2毫升2%的K2Cr2O7溶液正在100 C下加热30分钟后冷却。加水稀释至5毫升，正在580nm的波长下读取吸光光度值，即可算计出成长量。需用试剂做空缺对比，用规范样品做规范弧线。

　　还原糖测定法：还原糖平常是指单糖或寡糖，能够被微生物直接诈欺，通过还原糖的测定可间接反应微生物的成优点境，常用于大界限工业发酵分娩上微生物成长的向例监测。本事是，离心发酵液，取上清液，插足斐林试剂，滚水浴煮沸3分钟，取出加少许盐酸酸化，插足Na2S2O3邻近尽头时插足淀粉溶液，陆续加Na2S2O3至尽头，查表读出还原糖的含量。

　　氨基氮的测定：本事是，离心发酵液，取上清液，插足甲基红和盐酸作指示剂，插足0.02N的NaOH调色至色彩方才褪去，插足底物18%的中性甲醛，反映数刻，插足0.02N的使之变色，遵照NaOH的用量折算出氨基氮的含量。遵照培植液中氨基氮的含量，可间接反应微生物的成优点境。

　　其他心理物质的测定：P，DNA，RNA，ATP，NAM（乙酰胞壁酸）等含量以及产酸，产气，产CO2（用象征葡萄糖做基质），耗氧，黏度，产热等目标， 都可用于成长量的测定。也能够遵照反映前后的基质浓度转折，最终产怀抱，微生物活性三方面的测定反应微生物的成长。如我所正在BMP-2的发酵分娩上，随时监测溶氧量的转折和酸碱度的转折，占定细菌的长势。

　　微生物的检测，其发扬倾向是速捷，确切，简明，自愿化，目下良多生物成品公司诈欺古板微生物检测道理，维系差异的检测本事，计划了办法各异的微生物检测仪器摆设，正逐渐广博使用于医学微生物检测和科学探讨范围。比如：

　　1、抗作梗培植基和微生物数目速捷检测时间维系办理了古板微生物检测技巧不行办理的困难，为设置一套完善的抗作梗微生物检测编造奠定了坚实的根本。中科院广州分院互帮资产处供应的抗作梗微生物培植基，新型生化占定管，微生物计数卡，处境质料检测试剂盒等，可容易的用于多项检测。

　　2、BACTOMETER 全自愿各样总菌数及速捷细菌检测编造能足数幼时内取得监测结果，样本色彩及光学特色都不影响读数，对酵母和霉菌检测同样高度敏锐道理是诈欺电阻抗法（IMPEDANCE TECHNOLOGY）将待测样本与培植基置于反映考剂盒内，底部有一对不锈钢电极，测定因微生物成长而形成阻抗蜕变。如微生物成长时可将培植基中的大分子养分物经代谢更动为生动幼分子，电阻抗法可测试这种轻微转折，从而比古板平板法更速捷监测微生物的存正在及数目。测定项目包含总生菌数，酵母菌，大肠杆菌群，霉菌，乳酸菌，嗜热菌，革兰氏阴性菌，金黄色葡萄球菌等。